В конце XIV века на Дон вторглись полчища Тамерлана, окончательно разгромившие юго- западную часть Золотой Орды. Пали и были разграблены Азак и Тана. На северо- восточных землях бывшей Киевской Руси в XIV в. Сперва эти земли назывались Московским государством или просто Москвой, в иностранных источниках Московией. Одновременно южнорусские и западнорусские территории бывшей Киевской Руси в Великом княжестве Московском начали именовать «Малой Русью» или «Украиной». Хотя ещё долго тут сохранилось старое название «Русь». В XV веке, воспользовавшись упадком Золотой Орды, побережье Азовского моря захватывает Османская империя.
Азак стал называться Азовом, и турки превратили его в мощную крепость. Отсюда постоянно исходила угроза турецкого нашествия на юго- восточные границы Русского царства. В это время началась многовековая и кровопролитная битва за Азов. В XV веке в Диком Поле начали устраиваться пограничные засеки, ставятся сторожевые башни, возводятся крепости.
Появились здесь ватаги вольных людей, которые называли себя казаками. Дмитрий Вишневецкий в 1. Днепре начал строительство крепости на острове Малая Хортица, куда к нему сходились казаки; крепость была форпостом в борьбе против татарской агрессии. Во времена военного сотрудничества с Московским княжеством, Вишневецкий занимался второстепенными операциями на Дону, потом на Кавказе, во время которых, в 1. Черкасск (в наше время Старочеркасская — столица Донского казачества). После чего, в середине XVI века возникают первые казачьи городки на Дону: Раздоры, Митякин, Маныч — казаки становятся также и хозяевами Дона.
Поскольку власть московского князя не распространялась на эти земли, здесь существовала казачья вольница. Из разрозненных казачьих групп стала складывается военно- политическая организация — Войско Донское.